宿主細胞殘留蛋白HCP詳細介紹:
中國倉鼠卵巢細胞宿主蛋白酶聯檢測試劑盒是用來定量分析以中國倉鼠卵 巢細胞(Chinese Hamster Ovary cells,CHO)為表達細胞的生物藥物中宿主蛋白 雜質的試劑盒。首先,用不同濃度的CHO標準蛋白製作一條標準曲線,然後再根 據標準曲線來分析生物藥物中宿主細胞殘留蛋白的含量。具體方法為:先將CHO 標準蛋白或者待測樣品適當稀釋後加入已包被好抗CHO宿主蛋白抗體的96孔平 板中。經過1.5小時的保溫,宿主細胞蛋白與已經固定在平板上的抗體結合形成 抗原-抗體複合物。此複合物被隨後加入的生物素標記的抗CHO宿主蛋白的抗體 結合並進一步形成更高級的複合物,反應45分鍾後洗去未結合的物質。再加入鏈 黴親合素-辣根過氧化物酶複合物,靜置30分鍾。因鏈黴親合素可以與任何帶生 物素標記的抗體相結合,從而使鏈黴親合素-辣根過氧化物酶複合物連接到平板 上。接下來衝洗掉未結合的物質,加入TMB底物。固相上的酶催化底物產生顏色 反應,待顏色反應一段時間後,終止反應。用酶標儀在450 nm波長下測定其結果, 此結果能間接地反應結合到平板上的的宿主細胞蛋白數量的多少。根據CHO宿主 蛋白標準曲定量分析生物藥物中宿主細胞殘留蛋白的含量。
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